ctDNA提取试剂盒对血浆样本长期储存稳定性影响的实验研究

　　循环肿瘤DNA是来源于肿瘤细胞并释放到血液中的核酸片段，因其具有非侵入性、实时反映肿瘤基因状态等特性，在肿瘤早期诊断、疗效监测及预后评估等方面展现出巨大潜力。然而，血浆样本的长期储存可能导致ctDNA降解或损失，因此，选择能有效保持ctDNA稳定性的提取试剂盒至关重要。
 

　　一、实验方法与材料：
 

　　本研究选取了市售主流的五种ctDNA提取试剂盒，并收集了一批来自不同肿瘤类型的患者新鲜血浆样本，按照标准操作程序进行处理后，将其分为短、中、长期(如1个月、3个月、6个月、12个月)四个时间点进行冷冻保存。各时间点分别使用选定的试剂盒进行ctDNA提取，通过qPCR、ddPCR等技术检测特定肿瘤相关突变基因的丰度。
 

　　二、实验结果与分析：
 

　　实验结果显示，所有试剂盒在短期储存血浆样本中均能有效提取ctDNA，但在长期储存条件下，部分试剂盒表现出优异的性能，能够保持ctDNA完整性，其提取效率仅轻微下降或无显著变化。对比分析表明，含有特殊保护剂以及优化的裂解、纯化步骤的试剂盒，在长期储存样本中ctDNA的稳定性和提取效果更佳。
 

　　ctDNA提取试剂盒的选择对于确保血浆样本长期储存后的ctDNA稳定性具有直接影响。本研究揭示了某些ctDNA提取试剂盒在应对血浆样本长期储存挑战时所具备的优势，有助于指导未来临床实践和科研工作中ctDNA检测方案的设计与实施。此外，为进一步提升ctDNA长期储存的稳定性，有必要继续研发针对性更强、效果更优的提取技术和试剂盒产品。
 

　　后续研究可进一步探究血浆样本储存条件(如温度、冻融次数等)与ctDNA稳定性之间的具体关系，并结合生物信息学手段对提取出的ctDNA质量进行深度评价，以推动ctDNA作为液体活检标志物在精准医疗领域更为广泛而精确的应用。